在临床检验过程中有许多情况下标本采集后得不到及时检测,如仪器故障、试剂短缺、停水停电、以及远程检验需要标本的邮寄等等。往往要求标本4～8℃保存。究竟在不同温度条件下,血清标本放置多长时间检测不会超出实验室允许范围呢?有关临床化学检验的参考书中所提及内容不尽一致。为此我们设计试验对常用11项生化指标(ALT,AST,GGT,AKP,CK,HBDH,LDH,BUN,Cr,UA,Glu)在4种温度条件下,6个时间点进行了研究,旨在探讨不同温度与时间下保存对检测结果的影响。
1 材料与方法
1.1方法
标本采自某院健康体检者、患者,按常规要求采血后分离血清并进行适当混血制成10mL1例的标本。每例标本分成25份,每份0.38mL,放入具盖的Eppendorf管。1份用来即刻测定,其余24份分别放置-20℃、4℃、+20℃、+35℃4种温度下,于4、8、12、24、48和72小时后重新测定。共测50例(放置小时的标本例数不等,其即刻测定标本与其它标本也非同源。每次测定标本时均同时测定质控要求质控结果始终控制在0.5SD之内,否则结果舍弃重测。
1.2仪器与试剂
仪器为OLYMPUSAU600生化分析仪,试剂Leadman公司试剂,RANDOX公司质控品,中科都菱-25℃的医用冰箱,中科都菱4℃医用冰箱。
1.3统计学分析
每个时间点的数据以平均值x形式表示。分别列出测定均值及变异百分数与即刻数据相减后,再除以即刻数据得出变异的百分数±%(+表示升高,-表示降低),然后与实验室允许误差范围进行比较2结果不同温度下的不同时间测定结果分别见表1～4。
3讨论
从表1～4结果可以看出,总体趋势是随着保存温度的升高及保存时间的延长,各项目的变化值也越大。一般大变化者在35℃放置72小时后出现。除CK在35℃放置72小时其变化超出了实验室允许范围外,其余均在实验室允许范围之内;变化不明显的项目为AST、GGT、BUN。变化较明显的有ALT、UA、CK。变化大者为CK.放置后检测结果升高的有AKP、UA。下降的有ALT、LDH、HBDH、GLU、Cr、CK。CK在-20℃至20℃条件下保存72小时结果变化不大,而在35℃放置时测定值下降很快,说明CK在高温条件下酶活性很不稳定,与文献报告一致[1]。标本处理是检验前质量控制的一个重要环节,在全程质控中非常重要。我国临床实验室参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的有关规定,要求临床化学实验室一般应于2小时内分离血清后测定。但有时会遇到诸如仪器故障,试剂短缺,停水停电,远程检验标本的邮寄,错检漏检时的重新检验,医疗纠纷中的检验结果的准确性举证等等情况,这就要求把标本保存起来。一般认为,标本冷藏可抑制细胞代谢,稳定有些成分,但全血标本一般不宜冷藏。由于临床化学检验血液标本一般用血清,因此建议标本保存应以离心后分离血清保存。我国有关部门要求血清在22～25℃保存不能超过8小时,8小时内不能完成试验的应置4～8℃保存,48小时内不能完成试验的应置-20℃保存[2]。这就要求实验室要低温保存大量的标本。对照本次试验结果可以看出,10个项目在不同温度下保存72小时结果未超出实验室允许范围,是可以接受的。这就为我们更方便的保存标本提供了实验依据。有关血液标本的保存对生化检验结果的影响国内外已有许多报道[3,4],提示标本的保存要在密封避光的条件下低温保存,以防水分蒸发光线照射造成有些项目的检测结果发生变化.本研究对低温高温一起研究,除得到血清标本在低温条件下保存的稳定性结果之外,更找出在达不到低温保存条件时,一些生化项目在高温时的稳定性.对于标本邮寄等情况下如何保存标本尤具指导义。本次研究的保存时间长72小时,有些项目在较低温度条件下仍较稳定,至于更长时间放置,其稳定性如何尚需进一步探讨。
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