一 保存：胃腺癌SGC7901细胞保存在专业的医用冰箱中
二 目的：研究2-氨基4-(S-丁基磺酰亚氨)丁酸(BSO)对人胃腺癌SGC7901细胞化疗敏感性的影响
三 方法：采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)测定BSO对人胃腺癌SGC7901细胞的半数抑制浓度(IC50),进而利用无毒浓度的BSO和乙酰半胱氨酸(NAC)预处理细胞后,检测细胞对依托泊苷(VP-16)和多柔比星(ADM)化疗敏感性的变化,同时,采用试剂盒检测肿瘤细胞内谷胱甘肽(GSH)含量,γ-谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)试剂盒测定γ-GCS活性,并以2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCHF-DA)测定不同处理条件下细胞内活性氧(ROS)水平的改变。
四 结果 MTT实验显示,BSO对SGC7901细胞的IC50为3.5 mg/ml。根据药物无毒浓度选择原则,选取20%IC50BSO浓度(0.7 mg/ml)进行后续实验。结果显示,BSO通过抑制人胃腺癌SGC7901细胞内γ-GCS酶活性来减少GSH合成(P<0.05),促使细胞内ROS水平升高(P<0.01),加入NAC后可部分逆转BSO对GSH合成的抑制作用(P<0.05)。BSO与ADM和VP-16联合作用后,使得二者的IC50值分别下降55.9%和71%。
五 结论 BSO通过抑制γ-GCS的活性,降低细胞内GSH的含量,提高ROS水平,增强细胞化疗敏感性。
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